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【20230309期】特定蛋白方法學---散射＆透射？
2023-03-16
什么是特定蛋白？
特定(ding)蛋(dan)(dan)白(bai)：在人體血清中含(han)有(you)(you)(you)許多蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi),它們來源于組(zu)織細胞,是(shi)血清中含(han)有(you)(you)(you)的(de)(de)功能蛋(dan)(dan)白(bai),執行(xing)著各種功能,很多疾病都(dou)可以引起血清蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)的(de)(de)變化，蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)具有(you)(you)(you)良好的(de)(de)抗(kang)原(yuan)性(xing)，利用蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)的(de)(de)抗(kang)原(yuan)性(xing)，可以采用抗(kang)原(yuan)-抗(kang)體反應對(dui)具有(you)(you)(you)某一特定(ding)抗(kang)原(yuan)性(xing)的(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)進(jin)行(xing)測(ce)定(ding)，故又稱(cheng)特定(ding)蛋(dan)(dan)白(bai)檢測(ce)，可存在于血液(ye)、腦脊液(ye)、尿液(ye)等體液(ye)中。
02
特定蛋白檢測基本原理
1、光學的(de)理論發(fa)展：免(mian)疫比(bi)濁法(fa)是基于比(bi)色(se)法(fa)的(de)基礎發(fa)展，由(you)雙價(jia)(jia)的(de)抗體和單(dan)價(jia)(jia)的(de)抗原間反應產(chan)生了免(mian)疫沉淀。
2、透射(she)、散射(she)區別：
透射比濁(zhuo)：檢測由抗(kang)(kang)原(yuan)抗(kang)(kang)體結合成(cheng)抗(kang)(kang)原(yuan)抗(kang)(kang)體復合物，產生的濁(zhuo)度(du)隨抗(kang)(kang)原(yuan)量增加而增加，其透光率強度(du)隨之減弱，根據吸(xi)光度(du)值計算(suan)待測抗(kang)(kang)原(yuan)的量。
散(san)射(she)比(bi)濁：檢測由抗(kang)原抗(kang)體(ti)結合產生(sheng)成(cheng)抗(kang)原抗(kang)體(ti)復合物顆粒，導致的(de)光散(san)射(she)，散(san)射(she)光強(qiang)度(du)與單位時(shi)間內抗(kang)原抗(kang)體(ti)復合物的(de)生(sheng)成(cheng)速率成(cheng)正比(bi)。
03
特定蛋白檢測標準化工作
? 1967:WHO 67/86成(cheng)為首批免疫球蛋白(bai)校(xiao)準品(pin)
? 1980:CAP研(yan)制血(xue)清蛋(dan)白(bai)參考物質（RPSP-1),隨(sui)后又研(yan)制出RPSP-2/3/4
? 1993:IFCC研制CRM 470,一種通用(yong)的參考物質，包含了(le)14種血清特定蛋白，后更(geng)名為ERM-DA470
? 2008:IFCC研制(zhi)出最新(xin)的ERM-DA470K/IFCC
? 2010:IFCC為CRP制備液(ye)體冰凍(dong)參考(kao)物質ERM-DA472/IFCC,與ERM-DA470K/IFCC使(shi)用相同(tong)的清池
? 2010:IFCC研制(zhi)胱(guang)抑素(su)C參考物質(zhi)ERM-DA471/IFCC
? 2011:IFCC為CRP研制出新的參考物質ERM-DA474/IFCC
04
特定蛋白抗原過剩情況
1、使反應(ying)信號低于分析測量范圍上限對應(ying)的檢測信號，結(jie)果(guo)出現假性低值
如下圖，不同(tong)抗原濃度的(de)兩(liang)點具有相同(tong)的(de)測量(liang)信號(hao)：
05
特定蛋白檢測中鉤狀效應的影響
鉤狀(zhuang)效應即HOOK效應，是指由(you)抗原抗體(ti)比(bi)例不合適(shi)而導致(zhi)的假陰性的現(xian)象(xiang)。
抗體過量叫做前帶(dai)效應；
抗原過剩叫(jiao)做后代效應。
在恒定抗(kang)體濃(nong)度下增(zeng)加抗(kang)原濃(nong)度的(de)免疫(yi)沉淀(dian)反應
免疫比濁法面對(dui)抗原過剩的問題，該如何(he)解決(jue)？
3、如何處理(li)抗原過剩
儀器反應線性(xing)參(can)數的(de)設置：通過(guo)對事(shi)件反應進(jin)程曲(qu)線的(de)檢測，計算(suan)反應不同時段的(de)速率比值與(yu)預(yu)設的(de)參(can)數進(jin)行比較自(zi)動識別(bie)鉤狀(zhuang)效應的(de)出現
反應近終(zhong)點時再添加抗(kang)原
*文章圖(tu)片(pian)來源網絡，如(ru)侵權請聯(lian)系刪除(chu)。
特定(ding)蛋(dan)(dan)白(bai)：在人體血清中含(han)有(you)(you)(you)許多蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi),它們來源于組(zu)織細胞,是(shi)血清中含(han)有(you)(you)(you)的(de)(de)功能蛋(dan)(dan)白(bai),執行(xing)著各種功能,很多疾病都(dou)可以引起血清蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)的(de)(de)變化，蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)具有(you)(you)(you)良好的(de)(de)抗(kang)原(yuan)性(xing)，利用蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)的(de)(de)抗(kang)原(yuan)性(xing)，可以采用抗(kang)原(yuan)-抗(kang)體反應對(dui)具有(you)(you)(you)某一特定(ding)抗(kang)原(yuan)性(xing)的(de)(de)蛋(dan)(dan)白(bai)質(zhi)進(jin)行(xing)測(ce)定(ding)，故又稱(cheng)特定(ding)蛋(dan)(dan)白(bai)檢測(ce)，可存在于血液(ye)、腦脊液(ye)、尿液(ye)等體液(ye)中。
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特定蛋白檢測基本原理
1、光學的(de)理論發(fa)展：免(mian)疫比(bi)濁法(fa)是基于比(bi)色(se)法(fa)的(de)基礎發(fa)展，由(you)雙價(jia)(jia)的(de)抗體和單(dan)價(jia)(jia)的(de)抗原間反應產(chan)生了免(mian)疫沉淀。
2、透射(she)、散射(she)區別：
透射比濁(zhuo)：檢測由抗(kang)(kang)原(yuan)抗(kang)(kang)體結合成(cheng)抗(kang)(kang)原(yuan)抗(kang)(kang)體復合物，產生的濁(zhuo)度(du)隨抗(kang)(kang)原(yuan)量增加而增加，其透光率強度(du)隨之減弱，根據吸(xi)光度(du)值計算(suan)待測抗(kang)(kang)原(yuan)的量。
散(san)射(she)比(bi)濁：檢測由抗(kang)原抗(kang)體(ti)結合產生(sheng)成(cheng)抗(kang)原抗(kang)體(ti)復合物顆粒，導致的(de)光散(san)射(she)，散(san)射(she)光強(qiang)度(du)與單位時(shi)間內抗(kang)原抗(kang)體(ti)復合物的(de)生(sheng)成(cheng)速率成(cheng)正比(bi)。
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特定蛋白檢測標準化工作
? 1967:WHO 67/86成(cheng)為首批免疫球蛋白(bai)校(xiao)準品(pin)
? 1980:CAP研(yan)制血(xue)清蛋(dan)白(bai)參考物質（RPSP-1),隨(sui)后又研(yan)制出RPSP-2/3/4
? 1993:IFCC研制CRM 470,一種通用(yong)的參考物質，包含了(le)14種血清特定蛋白，后更(geng)名為ERM-DA470
? 2008:IFCC研制(zhi)出最新(xin)的ERM-DA470K/IFCC
? 2010:IFCC為CRP制備液(ye)體冰凍(dong)參考(kao)物質ERM-DA472/IFCC,與ERM-DA470K/IFCC使(shi)用相同(tong)的清池
? 2010:IFCC研制(zhi)胱(guang)抑素(su)C參考物質(zhi)ERM-DA471/IFCC
? 2011:IFCC為CRP研制出新的參考物質ERM-DA474/IFCC
04
特定蛋白抗原過剩情況
1、使反應(ying)信號低于分析測量范圍上限對應(ying)的檢測信號，結(jie)果(guo)出現假性低值
如下圖，不同(tong)抗原濃度的(de)兩(liang)點具有相同(tong)的(de)測量(liang)信號(hao)：
05
特定蛋白檢測中鉤狀效應的影響
鉤狀(zhuang)效應即HOOK效應，是指由(you)抗原抗體(ti)比(bi)例不合適(shi)而導致(zhi)的假陰性的現(xian)象(xiang)。
抗體過量叫做前帶(dai)效應；
抗原過剩叫(jiao)做后代效應。
在恒定抗(kang)體濃(nong)度下增(zeng)加抗(kang)原濃(nong)度的(de)免疫(yi)沉淀(dian)反應
免疫比濁法面對(dui)抗原過剩的問題，該如何(he)解決(jue)？
3、如何處理(li)抗原過剩
儀器反應線性(xing)參(can)數的(de)設置：通過(guo)對事(shi)件反應進(jin)程曲(qu)線的(de)檢測，計算(suan)反應不同時段的(de)速率比值與(yu)預(yu)設的(de)參(can)數進(jin)行比較自(zi)動識別(bie)鉤狀(zhuang)效應的(de)出現
反應近終(zhong)點時再添加抗(kang)原
*文章圖(tu)片(pian)來源網絡，如(ru)侵權請聯(lian)系刪除(chu)。